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Comment faire pousser des champignons à partir de spores

Comment faire pousser des champignons à partir de spores

Les champignons peuvent être cultivés à partir de spores ou de culture de tissus. culture de spores en résulte une population génétiquement diverse de champignon. culture de Spore est utile lors de l'isolation et de tester de nouvelles souches. Procédures pour la culture des champignons sont spécifiques à l'espèce. Il est supposé que le producteur sait comment faire pousser un champignon particulier d'intérêt une fois spawn suffisante est obtenue.

Instructions


Préparation des matériaux


•  Préparez 500-1000 ml de MEA en conformité avec les instructions du fabricant.

•  Placer la solution de chlorure de sodium dans des tubes à essai et l'AEM en Erlenmeyer. Ne pas remplir les tubes et les flacons plus de la moitié-plein et bouchon lâche.

•  Stériliser la solution de chlorure de sodium, MEA et boîtes de Pétri (si non stérile) dans un autocuiseur à 121 ° C et 15 psi pendant 15 à 20 minutes.

•  Retirez MEA, solution de chlorure de sodium et des boîtes de Pétri de l'autocuiseur et laisser refroidir.

•  Lorsque la MEA a suffisamment refroidi à manipuler, mais avant qu'il se solidifie, soulevez délicatement le couvercle de chaque boîte de Pétri, verser 10 à 20 ml de MEA fondu.

•  Que plaques d'AEM et chlorure de sodium refroidir à la température ambiante.

Placage les spores


•  Stériliser la boucle dans une flamme d'alcool. Laissez le fil rouge obtenir chaude, puis laisser refroidir pendant 5 secondes.

Tremper la boucle •  dans la solution de chlorure de sodium pour recueillir une goutte de liquide. Étaler la goutte sur une petite zone sur l'impression de spores (ou une autre source de spores) pour créer un mélange liquide / spores. Répétez plusieurs fois, la stérilisation de la boucle entre les deux.

•  Tremper la boucle dans la suspension du chlorure de sodium / spore de recueillir les spores dans la boucle.

•  Soulevez le couvercle d'une plaque de gélose juste assez loin pour permettre l'accès de la boucle.

•  salir la suspension de spores dans la boucle sur la surface de la gélose, et de récupérer la plaque. Répétez l'opération pour autant de plaques comme vous le souhaitez (au moins cinq ou six).

•  Sceller les boîtes de gélose avec Parafilm ou de pellicule plastique pour éviter le dessèchement. Incuber les spores dans des conditions de température et de lumière appropriés pour les espèces.

•  Respecter les plaques tous les quelques jours pour trouver la germination. Croissance flou blanc (un mycélium) sur la surface de la gélose indique la présence d'un champignon (mais il pourrait ne pas être un champignon qui se est développée à partir des spores).

Isoler une culture pure


•  Comparez le mycélium avec des descriptions publiées du mycélium vous essayez de croître.

•  Si le mycélium ressemble comme prévu, purifier la culture en découpant des morceaux et le transfert de plaques d'agar fraîches.

•  Continuer la coupe des morceaux à partir du bord d'attaque des colonies en expansion jusqu'à un pur, exempt de bactéries, isolat est obtenu.

Spawn Préparation


•  Découpez et le transfert des morceaux de mycélium purifié dans des bocaux de substrat de grains ou de copeaux de bois stérilisé. Le type de substrat utilisé dépend de l'espèce de champignon.

•  Incuber les maîtres frayer dans des conditions appropriées pour les espèces, jusqu'à ce que le substrat est entièrement colonisée par un mycélium.

•  secouer périodiquement les conteneurs de spawn pour briser le substrat et la vitesse la colonisation.

•  Utilisez les maîtres de spawn pour inoculer autres récipients de spawn à produire plus de spawn.

Inoculer le substrat de culture de champignons


•  Agiter les contenants de spawn vigoureusement pour briser le frai.

•  Verser le frai dans des sacs ou des bacs de substrat de culture de champignons.

•  Bien mélanger le frai dans le substrat en agitant ou en secouant.

•  Procédez selon des méthodes publiées pour la culture sur le mycélium et d'initier la fructification des espèces cultivées.

Conseils et avertissements


  • Travaillez rapidement lorsque l'on verse agar ou le transfert inoculum de réduire contamination.Time et d'effort peut être sauvé par achetés pré-coulé et plates.MEA agar stérile est un bon moyen d'usage général pour les champignons en croissance, mais un autre type de support peut être plus approprié en fonction de les espèces de champignons.
  • autocuiseurs deviennent chaudes et peuvent provoquer des blessures. Suivez maintenance et d'exploitation instructions.Sterilized les conteneurs de médias du fabricant sont chauds et doivent être manipulés avec des gants résistant à la chaleur pour éviter les brûlures et les calottes spills.Leave et couvercles de récipients étant stérilisée lâche pour permettre une égalisation de pression pendant le chauffage et cooling.All récipients à stériliser doit être en matériau autoclavable.